معلومة

6.8.3: قياسات الكتلة الميكروبية - علم الأحياء

6.8.3: قياسات الكتلة الميكروبية - علم الأحياء


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

أهداف التعلم

  • أذكر طرق قياس الكتلة الجرثومية

يتبع النمو البكتيري ثلاث مراحل: مرحلة التأخر ، ومرحلة السجل ، ومرحلة الثبات. كان قياس منحنى النمو البكتيري الأسي في مزرعة دفعية جزءًا تقليديًا من تدريب جميع علماء الأحياء الدقيقة ؛ تتطلب الوسيلة الأساسية تعداد البكتيريا (عد الخلايا) المباشر والفرد (المجهري ، قياس التدفق الخلوي) ، المباشر والجماعي (الكتلة الحيوية) ، غير المباشر والفرد (عد المستعمرات) ، أو غير المباشر والجماعي (العدد الأكثر احتمالا ، التعكر ، امتصاص المغذيات) أساليب. النماذج توفق بين النظرية والقياسات.

طرق القياس

هناك عدة طرق لقياس كتلة الخلية ، بما في ذلك مقياس الجاذبيةطريقة التي تستخدم موازين عادية لوزن عينة (وزن جاف / مل) بعد إزالة الماء.

طريقة غير مباشرة لحساب كتلة الخلية هي العكر. مزارع الخلايا عكرة: فهي تمتص بعض الضوء وتترك باقيه يمر. كلما زاد تركيز الخلية ، زادت درجة التعكر. أجهزة قياس الطيف الضوئي هي أجهزة كهربائية يمكنها قياس التعكر بدقة شديدة. توضع الثقافة في كفيت شفاف ؛ يتم وضع الكوفيت في الماكينة ويتم قياس العكارة على الفور. تساعد الصيغ الرياضية البسيطة في تحويل العكارة المكتشفة إلى تركيز الخلية. يُعرف استخدام القياس الطيفي لقياس تعكر الثقافات باسم قياس التعكر. لاحظ الاختلاف في الهجاء: العكر و قياس التعكر ليست نفس الكلمة.

في القياس الطيفي ، لا تحتاج الثقافات عادةً إلى التخفيف ، على الرغم من أن النتائج أعلى من كثافة خلية معينة تفقد الموثوقية. من بين جميع الأجهزة الكهربائية المستخدمة لعد الخلايا ، يعد مقياس الطيف الضوئي هو الأرخص وأسرع عملية تشغيله وأكثرها مباشرة. وقد جعل هذا القياس الطيفي الطريقة المفضلة للقياسات السريعة لنمو البكتيريا والتطبيقات ذات الصلة. توجد مقاييس طيفية يمكن فيها إدخال العديد من وحدات الكوفيت في وقت واحد ، مما يقلل من وقت العمل بشكل أكبر. بالإضافة إلى ذلك ، هناك مقاييس طيفية تتطلب أحجامًا صغيرة للغاية من الثقافة ، لا تزيد عن 1 ميكرولتر. هذا ، جنبًا إلى جنب مع الطبيعة العشوائية للمزارع السائلة ، يتيح فقط تقدير أرقام الخلايا.

طريقة إضافية لقياس الكتلة الميكروبية هي تحديد كمية الخلايا في ثقافة بواسطة طلاء الخلايا على طبق بتري. إذا تم توزيع الخلايا بكفاءة على اللوحة ، يمكن افتراض أن كل خلية ستؤدي إلى مستعمرة واحدة. يمكن بعد ذلك عد المستعمرات ، وبناءً على الحجم المعروف للثقافة التي انتشرت على الصفيحة ، يمكن حساب تركيز الخلية.

كما هو الحال مع غرف العد ، عادة ما تحتاج الثقافات إلى التخفيف بشدة قبل الطلاء ؛ خلافًا لذلك ، بدلاً من الحصول على مستعمرات مفردة يمكن عدها ، سيتم تشكيل ما يسمى بـ "العشب" ، مما ينتج عنه آلاف المستعمرات ملقاة فوق بعضها البعض. بالإضافة إلى ذلك ، يعد الطلاء أبطأ طريقة على الإطلاق: تحتاج معظم الكائنات الحية الدقيقة إلى 12 ساعة على الأقل لتشكيل مستعمرات مرئية.

النقاط الرئيسية

  • يمكّن حساب الوزن الجاف لعينة الفرد من حساب عدد الخلايا ، لكن الحساسية تقتصر على العينات التي تحتوي على أكثر من 10E8 بكتيريا لكل مليلتر.
  • قياس الطيف الضوئي هو طريقة غير مباشرة لحساب تركيزات الخلايا عن طريق قياس التغيرات في التعكر.
  • يمكن أيضًا حساب البكتيريا باستخدام طريقة الطلاء ، والتي تعتمد على عدد المستعمرات المتكونة في أطباق بتري التي تحتوي على وسائط نمو محددة.

الشروط الاساسية

  • قياس الطيف الضوئي: يستخدم مقياس الطيف الضوئي بشكل شائع لقياس النفاذية أو انعكاس الحلول. ومع ذلك ، يمكن أيضًا تصميمها لقياس الانتشار في أي من نطاقات الضوء المدرجة التي تغطي عادةً حوالي 200 - 2500 نانومتر باستخدام عناصر تحكم ومعايرات مختلفة. [2] ضمن هذه النطاقات من الضوء ، هناك حاجة إلى المعايرات على الجهاز باستخدام معايير تختلف في النوع اعتمادًا على الطول الموجي للقياس الضوئي. [3]
  • التدفق الخلوي: تقنية تستخدم لفرز الخلايا وتصنيفها باستخدام علامات الفلورسنت على سطحها.
  • مقياس الجاذبية: أداة تستخدم لقياس الاختلافات المحلية في مجال الجاذبية


شاهد الفيديو: وحدات قياس الكتلة. رابع (شهر نوفمبر 2022).