معلومة

لماذا تتطلب البكتيريا اللاهوائية قدرة منخفضة على الأكسدة والاختزال لوسائط ثقافتها؟

لماذا تتطلب البكتيريا اللاهوائية قدرة منخفضة على الأكسدة والاختزال لوسائط ثقافتها؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

انا اقرأ المطثية ، وهي بكتيريا لاهوائية في نصي في علم الأحياء الدقيقة وهي تقول ،

الأكثر أهمية من نقص الأكسجين هو توفير إمكانات الأكسدة المنخفضة بدرجة كافية في الوسط. ثالثًا يمكن تحقيقه بإضافة الأحماض الدهنية غير المشبعة ، وحمض الأسكوربيك ، والجلوتاثيون ، والسيستين ، إلخ.

لماذا ا؟ هل تقلل من الجذور الحرة للأكسجين أو شيء من هذا القبيل؟ حسنًا ، هل هذه موجودة في المطثيةموطنها الطبيعي؟


كلما زادت إمكانات الأكسدة والاختزال ، زاد الأكسجين المذاب في الوسائط. يضمن خفض هذه الإمكانية أن يكون تركيز الأكسجين أقل وأن اللاهوائية ستكون قادرة على النمو بسهولة.

يمكن القيام بعدة خطوات أثناء تحضير الوسائط مثل الغليان لإزالة الأكسجين وإضافة مادة كيميائية تقلل من إمكانية الأكسدة والاختزال هذه لإذابة الأكسجين مرة أخرى في الوسط.

أما بالنسبة للموئل الطبيعي ، فليس لديهم بشكل طبيعي أو يحتويون على كميات قليلة جدًا من الأكسجين. إذا كانت الموائل التي تحتوي على القليل من الأكسجين تحتوي على جزيئات أخرى قادرة على تقليل إمكانات الأكسدة والاختزال ، فهذا سؤال جيد.

يعد خفض إمكانات الأكسدة والاختزال أمرًا مهمًا بشكل أساسي للوسيط نظرًا لوجود أكسجين متضمن (يصعب إزالته بنسبة 100٪ أثناء تحضير الوسائط).

آمل أن تساعد إجابتي.


أنواع مختلفة من الوسائط المستخدمة في مختبر الأحياء الدقيقة

تحتوي وسائط الثقافة على العناصر الغذائية ومعايير النمو الجسدي اللازمة لنمو الميكروبات. لا يمكن أن تنمو جميع الكائنات الحية الدقيقة في وسط استزراع واحد ، وفي الواقع لا يمكن للكثير منها النمو في أي وسط استزراع معروف. تُعرف الكائنات الحية التي لا يمكنها النمو في وسط المزرعة الاصطناعية بالطفيليات الملزمة. المتفطرة الجذاموالريكتسيا والكلاميديا ​​و اللولبية شاحبتلزم الطفيليات. يمكن تمييز وسائط الاستزراع البكتيري بناءً على التركيب والاتساق والغرض.

تصنيف الوسائط الثقافية المستخدمة في مختبر الأحياء الدقيقة على أساس الاتساق

  1. وسط صلب: & # 8211 وسط صلب يحتوي على أجار بتركيز 1.5-2.0٪ أو بعض العوامل الأخرى ، معظمها مادة صلبة خاملة. الوسط الصلب له بنية فيزيائية ويسمح للبكتيريا بالنمو بطرق مفيدة أو مفيدة (مثل المستعمرات أو الشرائط). الوسط الصلب مفيد لعزل البكتيريا أو لتحديد خصائص الخلية المعزولة.
  2. وسائط شبه صلبة: & # 8211 يتم تحضيرها بأجار بتركيزات 0.5٪ أو أقل. لديهم الكاسترد الناعم مثل الاتساق ومفيد في زراعة البكتيريا الدقيقة أو لتحديد الحركة البكتيرية.
  3. سائل (مرق) متوسط: & # 8211 تحتوي هذه الوسائط على كميات محددة من العناصر الغذائية ولكن ليس لها أثر لعوامل التبلور مثل الجيلاتين أو الأجار. يخدم وسط المرق أغراضًا مختلفة مثل تكاثر عدد كبير من الكائنات الحية ودراسات التخمير والعديد من الاختبارات الأخرى. على سبيل المثال اختبارات تخمير السكر MR-VR مرق.

تصنيف وسائل الإعلام الثقافية على أساس التكوين

  1. وسط صناعي أو محدد كيميائيًا: & # 8211 الوسيط المحدد كيميائيًا هو الوسيط المحضر من المكونات النقية ، وبالتالي يُعرف موقعه الدقيق.
  2. وسيط غير اصطناعي أو غير معرف كيميائيًا: & # 8211 يحتوي الوسط غير الاصطناعي على مكون واحد على الأقل لم يتم تنقيته أو وصفه تمامًا ولا حتى متسقًا تمامًا من دفعة إلى أخرى. غالبًا ما تكون هذه بروتينات مهضومة جزئيًا من مصادر مختلفة للكائنات الحية. مرق المغذيات ، على سبيل المثال ، مشتق من مزارع الخمائر.

تصنيف وسائط الثقافة البكتيرية على أساس الغرض / الاستخدام الوظيفي / التطبيق

هناك حاجة إلى العديد من الوسائط ذات الأغراض الخاصة لتسهيل التعرف على أنواع معينة من البكتيريا وتعدادها وعزلها. لتلبية هذه الاحتياجات ، تتوفر العديد من الوسائط.

  1. وسائط الأغراض العامة / الوسائط الأساسية: & # 8211 الوسائط القاعدية هي في الأساس وسائط بسيطة تدعم معظم البكتيريا غير الحساسة. تعتبر مياه الببتون ومرق المغذيات وأجار المغذيات بمثابة وسط قاعدي. تستخدم هذه الوسائط بشكل عام للعزل الأولي للكائنات الحية الدقيقة.
  2. الوسط المخصب (عوامل النمو المضافة): & # 8211 إضافة عناصر غذائية إضافية على شكل دم ، مصل ، صفار البيض ، إلخ ، إلى الوسط القاعدي يجعلها وسائط غنية. تستخدم الوسائط المخصبة لنمو البكتيريا (شديدة الحساسية) من الناحية التغذوية. أجار الدم وأجار الشوكولاتة ومنحدر مصل لوفلر وما إلى ذلك هي بعض الوسائط الغنية. يتم تحضير أجار الدم بإضافة 5-10٪ (بالحجم) من الدم إلى قاعدة أجار الدم. يُعرف أجار الشوكولاتة أيضًا بأجار الدم الساخن أو أجار الدم المكسور.
  3. الوسائط الانتقائية والإثرائية: & # 8211 وهي مصممة لتثبيط البكتيريا المتعايشة أو الملوثة غير المرغوب فيها وتساعد على استعادة العامل الممرض من خليط من البكتيريا. في حين أن الوسائط الانتقائية تعتمد على أجار ، فإن وسائط التخصيب سائلة في الاتساق. كل من هذه الوسائط تخدم نفس الغرض. يمكن جعل أي وسائط أجار انتقائية عن طريق إضافة عوامل مثبطة معينة لا تؤثر على العامل الممرض المعني. تشمل الأساليب المختلفة لجعل الوسيط انتقائيًا إضافة المضادات الحيوية والأصباغ والمواد الكيميائية وتغيير الأس الهيدروجيني أو مزيج من هذه. & # 8211الوسيط الانتقائي: & # 8211قمع النمو التفاضلي. تم تصميم الوسط الانتقائي لقمع نمو بعض الكائنات الحية الدقيقة مع السماح بنمو أخرى. الوسيط الانتقائي هو وسط (صلب) قائم على أجار بحيث يمكن عزل المستعمرات الفردية.

تتضمن أمثلة الوسائط الانتقائية ما يلي:

  • يستخدم ثاير مارتن أجار لاستعادة النيسرية السيلانية التي تحتوي على مضادات حيوية فانكومايسين وكوليستين ونيستاتين.
  • يستخدم مانيتول ملح أجار وأجار ملح الحليب لاستعادة المكورات العنقودية الذهبية يحتوي على 10٪ كلوريد الصوديوم.
  • وسط تيلوريت البوتاسيوم المستخدم لاستعادة الخناق يحتوي على 0.04٪ تيلوريت البوتاسيوم.
  • أجار MacConkey المستخدم لأعضاء Enterobacteriaceae يحتوي على ملح الصفراء الذي يثبط معظم البكتيريا موجبة الجرام.
  • Pseudogel Agar (Cetrimide Agar) المستخدم لاستعادة P. aeruginosa يحتوي على cetrimide (عامل مطهر).
  • أجار الدم البنفسجي الكريستالي المستخدم لاستعادة S. pyogenes يحتوي على 0.0002٪ من الكريستال البنفسجي.
  • يتم استخدام Lowenstein Jensen Medium لاستعادة M. tuberculosis بشكل انتقائي من خلال دمج أخضر الملاكيت.
  • أجار ويلسون وبلير لاستعادة S. typhi أصبح انتقائيًا بإضافة صبغة خضراء لامعة.
  • تحتوي الوسائط الانتقائية مثل TCBS Agar المستخدمة لعزل ضمة الكوليرا من عينات البراز على درجة حموضة مرتفعة (8.5-8.6) ، مما يثبط معظم البكتيريا الأخرى. & # 8211وسط ثقافة الإثراء: & # 8211يستخدم وسط التخصيب لزيادة التركيز النسبي لبعض الكائنات الحية الدقيقة في المزرعة قبل الطلاء على وسط انتقائي صلب. على عكس الوسائط الانتقائية ، عادة ما تستخدم ثقافة الإثراء كوسيط مرق. وسائط التخصيب هي وسائط سائلة تعمل أيضًا على تثبيط التعايش في العينة السريرية. يتم استخدام مرق السيلينايت F ومرق رباعي الإيثيونات وماء الببتون القلوي (APW) لاستعادة مسببات الأمراض من عينات البراز.
  1. متوسط ​​التفاضل / المؤشر: & # 8211 تم تصميم بعض الوسائط بطريقة يمكن من خلالها التعرف على البكتيريا المختلفة على أساس لون مستعمرتها. تشمل الأساليب المختلفة دمج الأصباغ والركائز الأيضية وما إلى ذلك ، بحيث تظهر تلك البكتيريا التي تستخدمها كمستعمرات مختلفة الألوان. تسمى هذه الوسائط الوسائط التفاضلية أو وسائط المؤشر. تسمح الوسائط التفاضلية بنمو أكثر من كائن حي دقيق واحد مهم ولكن مع مستعمرات يمكن تمييزها شكليًا.

تتضمن أمثلة الوسائط التفاضلية ما يلي:

  • أملاح مانيتول أجار (تخمير مانيتول = أصفر)
  • أجار الدم (أنواع مختلفة من انحلال الدم مثل انحلال الدم α و و)
  • Mac Conkey agar (تخمير اللاكتوز ، المستعمرات الوردية ، بينما ينتج التخمير غير اللاكتوز مستعمرات شاحبة أو عديمة اللون.
  • TCBS (ضمة الكوليرا تنتج مستعمرات صفراء بسبب تخمر السكروز)
  1. وسائط النقل: & # 8211 يجب نقل العينات السريرية إلى المختبر فور جمعها لمنع النمو الزائد للكائنات أو المتعاشات الملوثة. يمكن تحقيق ذلك باستخدام وسائط النقل. تمنع هذه الوسائط تجفيف (تجفيف) العينة ، وتحافظ على العامل الممرض إلى النسبة المتعايشة وتمنع النمو الزائد للبكتيريا غير المرغوب فيها. بعض هذه الوسائط (Stuart’s & amp Amie’s) شبه صلبة من حيث الاتساق. تعمل إضافة الفحم على تحييد العوامل المثبطة.

* تستخدم وسيلة نقل كاري بلير ووسيلة فينكاترامان راماكريشنان (VR) لنقل البراز من مرضى الكوليرا المشتبه بهم.

* يستخدم محلول الجلسرين الملحي المخزن من ساش لنقل البراز من المرضى المشتبه في إصابتهم بالزحار العصوي.

* يتم استخدام وسط بايك لنقل المكورات العقدية من عينات الحلق.

  1. الوسائط اللاهوائية: تحتاج البكتيريا اللاهوائية إلى وسائط خاصة للنمو لأنها تحتاج إلى محتوى أكسجين منخفض ، وأكسدة منخفضة ، وإمكانية اختزال ، ومغذيات إضافية.

قد يلزم تكميل وسائط اللاهوائية بالعناصر الغذائية مثل الهيمين وفيتامين ك. وقد يتعين أيضًا تقليل هذه الوسائط بالوسائل الفيزيائية أو الكيميائية. يعمل غليان الوسط على طرد أي أكسجين مذاب. يمكن أن تؤدي إضافة 1٪ جلوكوز ، 0.1٪ ثيوجليكولات ، 0.1٪ حمض أسكوربيك ، 0.05٪ سيستين أو برادة حديد ساخن أحمر إلى تقليل الوسط. قبل الاستخدام ، يجب غلي الوسط في حمام مائي لطرد أي أكسجين مذاب ثم ختمه ببارافين سائل معقم.

يحتوي وسط روبرتسون للحوم المطبوخة (RCM) الذي يشيع استخدامه في زراعة أنواع المطثيات على عمود 2.5 سم من لحم قلب الثور و 15 مل من مرق المغذيات. يحتوي مرق ثيوجليكولات على ثيوجليكولات الصوديوم والجلوكوز والسيستين وخلاصة الخميرة والكازين المائي.

الميثيلين الأزرق أو ريسازورين هو مؤشر محتمل للحد من الأكسدة مدمج في الوسط. في ظل حالة مخفضة ، يكون الميثيلين الأزرق عديم اللون.


الملخص

لطالما كان الحديد (Fe) مطلبًا فسيولوجيًا معترفًا به للحياة ، ولكن بالنسبة للعديد من الكائنات الحية الدقيقة التي تستمر في الماء والتربة والرواسب ، فإن دوره يمتد إلى ما هو أبعد من مجرد الضرورة الغذائية. يمكن أن يعمل Fe (II) كمصدر للإلكترون للكائنات الدقيقة المؤكسدة للحديد في ظل كل من الظروف المؤكسدة ونقص الأكسجين ويمكن أن يعمل Fe (III) كمستقبل نهائي للإلكترون في ظل ظروف نقص الأكسجين للكائنات الدقيقة التي تقلل الحديد. بالنظر إلى أن الحديد هو رابع أكثر العناصر وفرة في قشرة الأرض ، فإن تفاعلات الأكسدة والاختزال بالحديد لديها القدرة على دعم مجموعات ميكروبية كبيرة في التربة والبيئات الرسوبية. على هذا النحو ، تم وصف تقسيم الحديد البيولوجي على أنه أحد أقدم أشكال التمثيل الغذائي الميكروبي على الأرض ، وكأحد الأيض خارج كوكب الأرض على الكواكب الأخرى الغنية بالحديد والمعادن مثل المريخ. علاوة على ذلك ، أدى التنوع الأيضي للكائنات الدقيقة المشاركة في هذه التفاعلات إلى تطوير تطبيقات التكنولوجيا الحيوية لمعالجة البيئات الملوثة وحصاد الطاقة.


الفصل الثاني والعشرون: اللاهوائية ذات الأهمية السريرية

-غرام (+)
-قضيب على شكل
- اللاهوائية
-بوغ تشكيل
- البكتيريا الممرضة من جنس المطثية
- موجود في الطبيعة ويمكن العثور عليه كمكون طبيعي للنباتات المتحللة والرواسب البحرية والمسالك المعوية للإنسان والفقاريات الأخرى والحشرات والتربة.

- أجار السيكلوسيرين - سيفوكسيتين - الفركتوز (CCFA)
(انتقائي وتفاضلي لمستعمرات C. صعب - & gt Yellow & quotground & quot المستعمرات
رائحة الحصان مستقرة)

- تفاعلات الليسيثيناز والليباز

- اندول البقعة ، اليورياز السريع ، التحلل الجيلاتيني المائي

حالة من تلف الأنسجة النخرية خاصة بالأنسجة العضلية. تسبب البكتيريا النخر العضلي بواسطة سموم خارجية معينة (ذيفان ألفا ، ذيفان مميت ، توكسين انحلالي)

- بداية حادة لآلام شديدة في البطن وإسهال ، وغالبًا ما يكون مصحوبًا بدم ، وقد يترافق مع قيء

- يتبعه التهاب نخر في الأمعاء الدقيقة يؤدي أحياناً إلى انثقاب الأمعاء

-غرام (+)
-قضيب الشكل
- اللاهوائية
- البكتيريا الممرضة من جنس كلوستريديوم
-تشكيل البوغ ، واحتشاد بكثافة


الميكروبات اللاهوائية الصارمة في القطب الجنوبي من ديشامبسيا أنتاركتيكا يكشف جذور نباتات الأوعية الدموية عن أهمية عالية في البيئة والتكنولوجيا الحيوية

يلعب المجتمع الميكروبي في التربة في أنتاركتيكا دورًا حاسمًا في نمو وتثبيت الكائنات الحية الأعلى ، مثل النباتات الوعائية. يعد تحليل تكوين الكائنات الحية الدقيقة للتربة في تلك الظروف البيئية القاسية أمرًا بالغ الأهمية لفهم الأهمية البيئية وإمكانات التكنولوجيا الحيوية. قمنا بتقييم كفاءة العزل ووفرة اللاهوائية الصارمة في نبات الأوعية الدموية ديشامبسيا أنتاركتيكا تم جمع جذور الغلاف الجوي في خليج أدميرالتي في أنتاركتيكا والتنوع البيولوجي المرتبط بمنظور التمثيل الغذائي والنشاط الأنزيمي. باستخدام طرق الزراعة اللاهوائية ، حددنا وعزلنا مجموعة من الأصناف الميكروبية التي ارتبطت وفرتها بالبكتيريا المعززة لنمو النبات (PGPB) وكان الوجود مستوطنًا حصريًا في القارة القطبية الجنوبية. كانت Firmicutes هي الأكثر وفرة (73 ٪) ، مع الجنس المطثية وجدت كأكثر الأصناف عزلة. هنا ، نصف معالجات التربة (التدرج الأكسجين والصدمة الحرارية) و 27 ظروف الثقافة الفيزيائية والكيميائية كانت قادرة على زيادة تنوع عزلات البكتيريا اللاهوائية. سمحت معالجة الصدمة الحرارية بعزل نسبة عالية من الأنواع الجديدة (63.63٪) ، وكذلك عزل الأنواع ذات النشاط الأنزيمي العالي (80.77٪) ، والتي سيكون لها تطبيقات صناعية محتملة. تساهم النتائج التي توصلنا إليها في فهم دور الميكروبات اللاهوائية فيما يتعلق بالبيئة والتطور وميزات التكنولوجيا الحيوية الأساسية للنظام البيئي في أنتاركتيكا.

هذه معاينة لمحتوى الاشتراك ، والوصول عبر مؤسستك.


داء المبيضات

المبيضات البيض يسبب 80٪ إلى 90٪ من الالتهابات الفطرية المهبلية وغيرها الكانديدا الأنواع و تورولوبسيس تسبب الباقي. يمكن عزل هذه الفطريات الرمية بأعداد صغيرة من 5٪ إلى 20٪ من النساء اللاتي لا تظهر عليهن أعراض. عادة ما تحدث الأعراض فقط عندما تتكاثر هذه الكائنات بأعداد كبيرة.

لا يُعرف المعدل الحقيقي لداء المبيضات الفرجي المهبلي. المرأة التي تحمل ج. البيض في الجهاز التناسلي يمكن أن يكون بدون أعراض أو يكون له أعراض من التهاب حاد. تعكس الأعراض الاستجابة المناعية للمضيف. يشير التشخيص دون الاستفادة من الفحص المجهري أو الثقافة إلى أن نصف النساء المصابات بداء المبيضات يعانين بدلاً من ذلك من حالات أخرى. 1 بحلول سن الكلية ، يكون لدى حوالي نصف النساء نوبة واحدة من داء المبيضات تم تشخيصها بواسطة الطبيب. 35 يزيد داء المبيضات بعد الحيض ، ويرجع ذلك جزئيًا إلى بدء النشاط الجنسي. 36 ، 37 يزداد معدل الإصابة بداء المبيضات أثناء الحمل. يمكن أن تصاب النساء بعد سن اليأس اللائي يعطين بدائل الإستروجين بداء المبيضات.

تواتر الجماع مرتبط بداء المبيضات. 36 ، 37 عدد الشركاء الجنسيين 36 والاتصال الفموي التناسلي 37 لا يزيد من معدل داء المبيضات. يبدو أن داء المبيضات مرتبط بشكل ضعيف بجرعات عالية من حبوب منع الحمل التي تحتوي على هرمون الاستروجين. 38 يبدو أن الجماع الجنسي باستخدام مبيد النطاف النونوكسينول -9 يزيد من الاستعمار الكانديدا. 39 يبدو أن الغسل بالمنتجات التجارية يغير الفلورا المهبلية مؤقتًا 32 وقد ارتبط بشكل متقطع بتكرار الكانديدا عدوى. 36 ، 37

ترتبط المضادات الحيوية ارتباطًا وثيقًا بداء المبيضات ، وقد يكون هذا الارتباط مهمًا بشكل خاص للنساء المصابات بالعدوى المتكررة. 41 ليس من الواضح ما إذا كانت المضادات الحيوية تقتل البكتيريا مثل اكتوباكيللوس التي قد تمنع نمو الكانديدا أو استخدام آليات أخرى. 6

قد يلعب النظام الغذائي دورًا ضئيلًا في دور داء المبيضات. 42 ممارسات النظافة ، بما في ذلك حركات الأمعاء المتكررة ، مسح الاتجاه بعد حركة الأمعاء ، نوع حماية الدورة الشهرية ، نسيج الملابس الداخلية ، والملابس الضيقة يبدو أنها لا تلعب أي دور في داء المبيضات. 37 يرتبط تثبيط المناعة من عدوى فيروس العوز المناعي البشري ج. تورولوبسيس الإصابة 34 وزيادة معدلات المرئ وربما المهبل ج. البيض عدوى. يرتبط مرض السكري غير المنضبط بداء المبيضات ، خاصة مع الالتهابات غير المستجيبة.

غالبًا ما يمثل تكرار الأعراض الشديدة النموذجية مثل الحكة وتهيج الفرج داء المبيضات ، ولكن الأعراض غير النمطية أو البسيطة يتم تشخيصها ذاتيًا بشكل غير صحيح في حوالي نصف الحالات. 43 إلى جانب اكتشاف درجة حموضة منخفضة والنتائج المجهرية التي تمت مناقشتها سابقًا ، تعتبر الثقافات ضرورية للنساء المصابات بداء المبيضات المشتبه به اللواتي تظهر عليهن نتائج مجهرية. الكانديدا سلبية. بين النساء إيجابيات الثقافة مع أعراض الفرج من عسر التبول الخارجي ، الحكة ، التورم ، أو الاحمرار ، كان جبل KOH المبلل إيجابيًا لحوالي 60 ٪ فقط ، مما ترك 30 ٪ من النساء غير مشخصات بواسطة KOH. 4

يشير داء المبيضات غير المعقد إلى نوبات متفرقة متفرقة مع أعراض خفيفة إلى معتدلة لدى امرأة عادية غير حامل. عمليا كل الالتهابات غير المعقدة ناتجة عن ج. البيض. يشير داء المبيضات المعقد إلى عدوى متكررة أو عدوى بأعراض حادة أو عدوى لدى النساء الحوامل أو المصابات بداء السكري أو المثبطات المناعة. تحدث العديد من حالات العدوى المعقدة بسبب عدمالبيض محيط.

عدوى حادة غير متكررة وغير متكررة.

يظل العلاج الموضعي بالآزول هو الخيار الأول لعلاج داء المبيضات الحاد النادر. الأزولات هي فطريات فطرية من خلال تثبيطها لتخليق ergosterol (والغشاء). الكانديدا يتم قتل الكائنات الحية بواسطة الخلايا الليمفاوية المضيفة من خلال آليات المناعة الخلوية. يمكن تحقيق تأثير فطري محدود فقط من خلال تركيز عالٍ من الأزولات التي تنتج تلفًا مباشرًا في الغشاء. الأزولات الموضعية فعالة وجيدة التحمل وغير مكلفة نسبيًا. تشمل المنتجات المتاحة بوكونازول (فيمستات) وكلوتريمازول (جين لوتريمين ومايسيليكس) وميكونازول (مونيستات) وتيركونازول (تيرازول). تتوفر مجموعة واسعة من الجرعات في شكل كريم وتحاميل (الجدول 2). بالنسبة لبعض المستحضرات ، تمت زيادة فترة العلاج إلى مرتين يوميًا أو تمت زيادة الجرعة من 100 إلى 200 مجم بينما تم تقليل مدة العلاج بشكل متزامن من 7 إلى 3 أيام. كانت معدلات الشفاء للدورة التي تستغرق 3 أيام مساوية للدورات الأطول لداء المبيضات غير المعقد. عادةً ما تكون معدلات الشفاء قصيرة المدى (من 7 إلى 30 يومًا) باستخدام الأزولات الموضعية المستخدمة لمدة 3 إلى 7 أيام 80٪ إلى أكثر من 90٪. لا يوجد ما يشير إلى أن معدلات الشفاء تختلف بين مختلف أنواع الأزولات أو بين التحاميل والشكل الكريمي.

الجدول 2. أنظمة آزول الموصى بها لعلاج داء المبيضات الفرجي المهبلي

كلوتريمازول (جين لوتريمين ، ميسيليكس)

لا أوصي بالعلاج بجرعة واحدة ، لأن التجربة السريرية تشير إلى أن الدورات التي تستغرق يومًا واحدًا أقل فعالية مما تشير إليه التقارير المنشورة. يمكن تفسير ذلك جزئيًا بالميل إلى تضمين النساء اللواتي يعانين من أعراض خفيفة وقصيرة المدة وليس لديهن داء المبيضات السابق في الدراسات. عادة ، يتم الإبلاغ عن معدلات الشفاء السريري قصيرة المدى (7 إلى 30 يومًا) فقط ، وتحدث معدلات فشل فطري أعلى في 30 يومًا عندما يتم إعطاء المرضى جرعة واحدة مقارنة مع دورة علاج أطول. 44 ومع ذلك ، فليس من المؤكد أن زيادة معدل الكانديدا يرتبط التعافي بعد العلاج بزيادة معدلات داء المبيضات السريري اللاحقة ، وقد تكون مدة العلاج أقل أهمية في حالات العدوى المتفرقة غير المعقدة مقارنةً بحالات العدوى المعقدة.

يجعل فلوكونازول أزول الفم الدواء الفموي خيارًا آمنًا لداء المبيضات المهبلي. تعتبر جرعة 150 مجم عن طريق الفم لمرة واحدة فعالة للمرضى الذين يعانون من أعراض خفيفة إلى متوسطة. 45 أصبح هذا الدواء شائعًا لدى المرضى لأن الكريم المهبلي لا يستخدم ولأطباء لأن استخدامه على المدى القصير لا يسمم الكبد ، وهي مشكلة حالت دون الاستخدام الواسع للكيتوكونازول. ومع ذلك ، غالبًا ما يلزم تكرار الجرعة خلال 4 إلى 5 أيام للمرضى الذين يعانون من أعراض شديدة بسبب معدلات الفشل المرتفعة التي تتجاوز معدلات فشل العلاج المحلي. 45 يحتاج الأطباء إلى أن يكونوا على دراية بالتفاعل الدوائي بين أدوية الفلوكونازول ومضادات الهيستامين التي تطيل فترة QTc ، ونقص السكر في الدم عن طريق الفم ، والكومادين ، والأدوية الأخرى (استشر مرجعًا دوائيًا). 46 بين المرضى الذين لا يعانون من كبت المناعة ، من المحتمل ألا يؤدي الاستخدام الواسع النطاق إلى المقاومة.

تم استبدال العلاج الموضعي بالبولين المكون من النيستاتين بمعالجة الآزول الموضعية. النيستاتين جيد التحمل وغير مكلف ، ولكن معدلات الشفاء من 50٪ إلى 80٪ أقل من تلك الخاصة بالأزولات. النيستاتين هو خيار الخط الثاني في علاج داء المبيضات غير المعقد.

توفر كبسولات حمض البوريك (600 مجم أو مسحوق حمض البوريك في كبسولات جيلاتينية بحجم 0) التي يتم إدخالها مرتين يوميًا لمدة 14 يومًا معدلات علاج سريرية مماثلة للأزولات الموضعية. 47 لم يتم الكشف عن أيون البورون في الدم ، 48 وحمض البوريك غير مكلف وجيد التحمل. ومع ذلك ، يمكن أن يتسبب حمض البوريك في حدوث تقرحات في المريء إذا تم ابتلاعه عن غير قصد ، ويجب تخزين المستحضر في زجاجات ذات أغطية واقية للأطفال ، وحفظها في خزانة أدوية مغلقة ، واستخدامها بحذر عندما يكون الأطفال الصغار في المنزل. بسبب سلامة الجنين غير المثبتة ، لا ينبغي استخدام حمض البوريك أثناء الحمل. يعتبر علاج الجنطيانا البنفسجي فعالاً في علاج داء المبيضات ، لكن تلطيخ الملابس والجلد يحد من استخدامه للحالة النادرة التي لا تستجيب لأدوية أخرى. سوربات البوتاسيوم وبوفيدون اليود لها فعالية محدودة ضد داء المبيضات.

محلي الكانديدا عادة ما يكون العلاج جيد التحمل ، وردود الفعل غير عادية. في حالة حدوث تهيج مهبلي متزايد مع الاستخدام ، يجب أن يتوقف الدواء فورًا ويتحول إلى مستحضر مختلف. معظم هذه التهيجات ناتجة عن ردود فعل على المركبات الكريمية & ldquoinactive & rdquo.

عدوى متكررة بسرعة.

عادة ما يكون المرضى الذين ظهرت عليهم الأعراض بعد أيام قليلة من إكمال دورة العلاج قد أخذوا دورة قصيرة فقط أو كانوا غير ممتثلين. في كثير من الأحيان ، تكفي دورة أطول أو إعداد مختلف. مقاومة الكانديدا الأدوية المضادة للفطريات غير شائعة ، وبعض المرضى الذين يعانون من أعراض مستمرة يعانون من أمراض أخرى. المرضى الذين يعانون من تكرار سريع يحتاجون إلى داء المبيضات الموثق من قبل KOH الرطب أو الثقافة أو كليهما. المرضى دون دليل موضوعي الكانديدا ولكن مع استمرار الأعراض يجب فحصها بحثًا عن التهاب المهبل أو التهاب الفرج الناجم عن حالات أخرى. يجب مراعاة التهاب الجلد العصبي ، والحزاز المسطح ، والتصلب الحزاز ، ومتلازمة الفرج الحارقة ، والتهاب الغدة الدهليزي الطفيف.

عادة ما يكون للعدد القليل من المرضى الذين يعانون من مقاومة الأدوية انخفاض في الأعراض أثناء العلاج ولكن تكرار الأعراض سريعًا بعد التوقف عن تناول الدواء. C. البيض تكاد تكون حساسة بشكل موحد لجميع الأزولات. ومع ذلك ، فإن مقاومة الأزولات أكثر شيوعًا بين الفطريات غير العادية مثل المبيضات المبيضات ، المبيضات الاستوائية، أو غير ذلك منالمبيضات البيض 49 ، والمقاومة المحتملة في حالة وجود هذه الفطريات. يمكن تجربة علاج Terconazole لأنه يحتوي على نشاط أكبر من الأزولات الأخرى C. glabrata و C. الاستوائية. يمكن تحويل المرضى إلى أدوية نونازول أو النيستاتين أو حمض البوريك. حمض البوريك أكثر فعالية من الفلوكونازول في معالجةالبيض داء المبيضات الفرجي المهبلي. 49 ، 50 قد يكون العلاج بالجنطيانا البنفسجي مفيدًا أيضًا. في حالات نادرة ، لا تكون أي من الأدوية الموضعية فعالة في القضاء على الفطريات المهبلية ، ويجب إعطاء النيستاتين أو حمض البوريك كل يومين إلى ثلاثة أيام إلى أجل غير مسمى لقمع الفطريات المقاومة بدلاً من القضاء عليها.

كانت حالات فشل العلاج نادرة جدًا لداء المبيضات لدرجة أنه لم يتم إجراء دراسات منهجية لتحديد أسباب فشل العلاج. كانت فترة المتابعة قصيرة جدًا (30 يومًا أو أقل) لإجراء تقييم دقيق لتكرار حالات الفشل. تم ذكر فشل الامتثال ، والفشل الزائف بسبب رد فعل على السيارة ، ومقاومة الأدوية. تتطلب نظريتان بارزتان أخريان لفشل العلاج المناقشة.

النظرية الأولى هي أن داء المبيضات المهبلي المتكرر ينتج عن الجهاز الهضمي الكانديدا. الكانديدا تم العثور على الكائنات الحية بمعدلات أعلى في تجويف الفم والجهاز الهضمي للمرضى الذين يعانون من داء المبيضات من الضوابط. 51 ومع ذلك ، يحمل معظم المرضى الكانديدا في الجهاز الهضمي دون الإصابة بداء المبيضات المهبلي ، وفي الدراسات الطولية ، لم يتم ربط داء المبيضات المهبلي بالإصابة بالجهاز الهضمي الكانديدا. قدم العلاج بالنيستاتين عن طريق الفم نتائج مختلطة. لم يكن للنيستاتين الفموي تأثير كبير ، على الرغم من انخفاض طفيف إحصائيًا في اللاحق الكانديدا حدث التهاب الفرج في المجموعة التي تتلقى نيستاتين عن طريق الفم مقارنة مع الدواء الوهمي. 52 كما أن تناول 4 أونصات من الزبادي المحتوي على العصيات اللبنية مرتين يوميًا قد وفر أيضًا انخفاضًا طفيفًا في التكرار. 53

تتضمن النظرية الثانية الانتقال الجنسي لداء المبيضات المتكرر. الشركاء الجنسيون من الذكور لمرضى داء المبيضات المهبلي لديهم معدلات أعلى من الاستعمار التناسلي مقارنة بالضوابط. 54 من المحتمل أن يحدث الانتقال الجنسي لعدد صغير (يقدر بنحو 10 ٪ إلى 15 ٪) من الذكور الذين لديهم الكانديدا التهاب الحشفة المتزامن مع داء المبيضات المهبلي لشريكهم. ومع ذلك ، فإن 20 ٪ فقط من الشركاء الجنسيين من الذكور مستعمرون المبيضات ، وعلاج الذكور لم ينقص داء المبيضات المهبلي للإناث. يبدو أن معظم الذكور مستعمرون بشكل سلبي من قبل الإناث بدلاً من لعب دور رئيسي في داء المبيضات المهبلي المتكرر.

يحدث التقليل المؤقت لأعراض الفرج مع حمام المقعدة يليه تجفيف شديد للجلد باستخدام مجفف الشعر باستخدام إعداد الحرارة المنخفضة. يمكن أيضًا وصف كريمات الآزول الموضعية للاستخدام المباشر للفرج ، ولكن تتوفر معلومات قليلة عن فعاليتها.

كان اتباع نظام غذائي لتقليل مستويات الكربوهيدرات المرتفعة مفيدًا إلى حد ما لمجموعة فرعية من المرضى الذين أصيبوا بداء المبيضات بعد فترة وجيزة من تناول كمية عالية غير معتادة من السكر. بين مرضى السكر ، لا ينجح علاج داء المبيضات عادة حتى يتم التحكم في مستويات الجلوكوز. لقد انتشر تجنب الأطعمة المصنوعة من الخميرة ، لكن التوثيق العلمي للفعالية غير موجود. كائنات الخميرة في الغذاء ليست من نفس الأنواع التي تسبب التهاب المهبل. تنتشر الخميرة المسببة لالتهاب المهبل في البيئة وعلى الجلد بحيث يصعب تصديق أن النظام الغذائي الخالي من الخميرة يؤثر على داء المبيضات المهبلي. يمكن اعتبار التوقف عن العلاج بالمضادات الحيوية ، إن أمكن ، في عدد قليل من المرضى الذين يتناولون مضادات الميكروبات المزمنة. إن التوقف عن العلاج بوسائل منع الحمل عن طريق الفم أمر مثير للجدل وربما يكون ذا فائدة محدودة. قد يكون التخلي عن الملابس الضيقة سيئة التهوية قليل الفائدة.

العدوى المتكررة المزمنة.

تم التعرف على مجموعة فرعية مهمة من المرضى مصابون بنوبات مزمنة أو متكررة بشكل متكرر (أربع سنوات على الأقل) من داء المبيضات المهبلي. يتراكم هؤلاء المرضى لتمثيل عدد كبير من المرضى المصابين بداء المبيضات المهبلي في عيادات معينة.

ليس من الواضح ما إذا كان المرضى الذين يعانون من داء المبيضات المتكرر المزمن لديهم عيب مناعي محدود لا تقتل فيه الخلايا الليمفاوية الكانديدا الكائنات الحية في المهبل أو أسباب أخرى للتكرار. لا يرتبط التكرار بسلالات غير عادية أو مقاومة للأدوية الكانديدا، وعدد قليل من المرضى يعانون من مرض السكري أو تناول موانع الحمل الفموية أو الأدوية المثبطة للمناعة أو المضادات الحيوية. يجب أخذ النساء اللواتي يعانين من تكرار الإصابة بداء المبيضات أو داء المبيضات المهبلي اللائي لا يستجيبن للعلاج في الاعتبار من أجل اختبار فيروس نقص المناعة البشرية. ومع ذلك ، فإن قلة من النساء المصابات بداء المبيضات المتكرر مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية أو أي عامل آخر معروف بشكل شائع يعرض المرضى للإصابة بداء المبيضات.

غالبًا ما يكون من الصعب إدارة المرض المصحوب بأعراض ، ولكن الاختراق المهم كان العلاج القمعي المزمن المماثل لتلك المستخدمة في عدوى المسالك البولية. استخدمت الدراسة الأولية جرعة علاجية مقدارها 400 مجم من الكيتوكونازول الفموي لمدة 14 يومًا ، تليها جرعة مداومة لمدة 6 أشهر. 55 السمية المحتملة للكبد والنفقات تحد من استخدام الكيتوكونازول ، ويجب أن يتكون نظام العلاج لمدة 14 يومًا من فلوكونازول يعطى كل 4 أيام أو أزول مهبلي. في دراسة مضبوطة ، أنتج الكيتوكونازول معدل تكرار عند 6 أشهر بنسبة 70 ٪ لأولئك الذين يتناولون الدواء الوهمي و 5 ٪ لأولئك الذين يتناولون الكيتوكونازول يوميًا. 55 تتضمن أنظمة الصيانة العملية إدارة الآزول الموضعي كل أسبوعين أو أسبوعيًا. 56 تم تحقيق نتائج مماثلة باستخدام إيتراكونازول عن طريق الفم أو فلوكونازول كصيانة أو حمض البوريك الموضعي. 57 قد يستأنف تكرار داء المبيضات المهبلي بالمعدلات نفسها التي كانت عليه قبل الكبت عندما يتوقف العلاج الوقائي. 55

إن الامتصاص الجهازي للأزولات أو النيستاتين من المهبل محدود للغاية بحيث يمكن استخدام كليهما بأمان خلال جميع مراحل الحمل. لا ينبغي استخدام حمض البوريك والفلوكونازول والإيتراكونازول والكيتوكونازول أثناء الحمل. بالمقارنة مع النساء غير الحوامل ، يكون داء المبيضات أثناء الحمل أكثر مقاومة للعلاج ، وأكثر عرضة للانتكاس ، ويستجيب بشكل أفضل للعلاج لمدة 7 أو حتى 14 يومًا مقارنة بالعلاج من يوم إلى 3 أيام.


الكاتب الاشتراكات

قام SO بمراجعة الأدبيات ، وكتابة المسودة الأولية والمراجعات ، وتصميم الأشكال ، وإدارة المشروع. ساهم BB في مراجعة الأدبيات والمراجعات وقدم مراجعة نقدية. قدمت DA و JR و PL و OL مراجعة نقدية وتعليقات. كان لدى JJ و LH الأساس المنطقي لهذا العمل ، وساهما في مراجعة الأدبيات ، وأشرف على مراجعات المخطوطات. بالإضافة إلى ذلك ، ساهم LH في تصميم الشكل. ساهم JJ أيضًا في تصوير زجاجات ثقافة الدم.


الملخص

يعد الفهم الأعمق للاستجابات الفسيولوجية التي تحدثها المضادات الحيوية أمرًا بالغ الأهمية لتحديد وسائل تعزيز ترسانتنا الحالية من المضادات الحيوية. يُفترض أن المضادات الحيوية المبيدة للجراثيم ذات الأهداف المتنوعة تقتل البكتيريا ، وذلك جزئيًا عن طريق تحفيز إنتاج أنواع متفاعلة ضارة. تم دعم هذه الفكرة من قبل العديد من المجموعات ولكن تم تحديها مؤخرًا. نحن هنا نختبر الفرضية بقوة باستخدام المقايسات البيوكيميائية والإنزيمية والفيزيائية الحيوية جنبًا إلى جنب مع التجارب الوراثية والظاهرية. استخدمنا لأول مرة رواية داخل الخلايا H2ا2 مع لوحة متنوعة كيميائيًا من الأصباغ الفلورية الحساسة لمجموعة من الأنواع التفاعلية لإثبات أن المضادات الحيوية تحفز على نطاق واسع إجهاد الأكسدة والاختزال. تكشف تحليلات التعبير الجيني اللاحقة أن استجابات الإجهاد التأكسدي المعقدة التي يسببها المضادات الحيوية تختلف عن الاستجابات الكنسية الناتجة عن المستويات فوق الفيزيولوجية لـ H2ا2. طورنا بعد ذلك طريقة لقياس التنفس الخلوي ديناميكيًا ووجدنا أن المضادات الحيوية للجراثيم تزيد من استهلاك الأكسجين ، مما يشير إلى تغييرات كبيرة في فسيولوجيا الأكسدة والاختزال البكتيري. نوضح كذلك أن الإفراط في التعبير عن إنزيم إصلاح الكاتلاز أو عدم تطابق الحمض النووي ، و MutS ، والمعالجة المسبقة لمضادات الأكسدة يحد من فتك المضادات الحيوية ، مما يشير إلى أن أنواع الأكسجين التفاعلية تساهم بشكل سببي في قتل المضادات الحيوية. بشكل حاسم ، تقلصت فعالية قتل المضادات الحيوية في ظل ظروف لاهوائية صارمة ولكن يمكن تعزيزها بالتعرض للأكسجين الجزيئي أو عن طريق إضافة متقبلات إلكترونية بديلة ، مما يشير إلى أن العوامل البيئية تلعب دورًا في قتل الخلايا المهيأة فيزيولوجيًا للموت. يقدم هذا العمل دليلًا مباشرًا على أن المضادات الحيوية للجراثيم ، في اتجاه مجرى تفاعلاتها الخاصة بالهدف ، تحفز تعديلات الأكسدة والاختزال المعقدة التي تساهم في تلف الخلايا والوفاة ، وبالتالي دعم نموذج متطور وموسع لقاتل المضادات الحيوية.

أدى تزايد حدوث العدوى المقاومة للمضادات الحيوية إلى جانب انخفاض خط أنابيب المضادات الحيوية إلى خلق تهديد عالمي للصحة العامة (1 ⇓ ⇓ ⇓ –6). لذلك ، هناك حاجة ملحة لتوسيع فهمنا المفاهيمي لكيفية عمل المضادات الحيوية واستخدام الأفكار المكتسبة من هذه الجهود لتعزيز ترسانتنا من المضادات الحيوية. It has been proposed that different classes of bactericidal antibiotics, regardless of their drug–target interactions, generate varying levels of deleterious reactive oxygen species (ROS) that contribute to cell killing (7, 8). This unanticipated notion, built upon important prior work (9 ⇓ –11), has been extended and supported by multiple laboratories investigating wide-ranging drug classes (e.g., β-lactams, aminoglycosides, and fluoroquinolones) and bacterial species (e.g., الإشريكية القولونية, الزائفة الزنجارية, السالمونيلا المعوية, السل الفطري, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, راكدة بومانية, Burkholderia cepecia, الالتهاب الرئوي العقدية, المكورات المعوية البرازية) using independent lines of evidence (12 ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ –39). Importantly, these ongoing efforts have served to refine aspects of the initial model and show that antibiotic-induced ROS generation is a more complex process than originally suggested, likely involving additional means of production.

The redox stress component of antibiotic lethality is hypothesized to derive from alterations to multiple core aspects of cellular physiology and stress response activation. Specifically, this component includes alterations to central metabolism, cellular respiration, and iron metabolism initiated by drug-mediated disruptions of target-specific processes and resulting cellular damage (Fig. 1أ). Important support for this hypothesis can be found in pathogenic clinical isolates whose drug tolerance involves mutations in oxidative stress response and defense genes and not exclusively in drug target mutagenesis (40 ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ ⇓ –48).

Bactericidal antibiotics promote the generation of toxic reactive species. (أ) Bactericidal antibiotics of different classes are capable of inducing cell death by interfering with their primary targets and corrupting target-specific processes, resulting in lethal cellular damage. Target-specific interactions trigger stress responses that induce redox-related physiological alterations resulting in the formation of toxic reactive species, including ROS, which further contribute to cellular damage and death. (ب) Treatment of wild-type بكتريا قولونية with ampicillin (Amp, 5 μg/mL), gentamicin (Gent, 5 μg/mL), or norfloxacin (Nor, 250 ng/mL) induces ROS, detectable by several chemically diverse fluorescent dyes with ranging specificity. One-way ANOVA was performed to determine statistical significance against the no-dye autofluorescence control. The dyes used were 5/6-carboxy-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (Carboxy-H2DCFDA) 5/6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (CM-H2DCFDA) 4-amino-5-methylamino-2´,7´-diflurorescein diacetate (DAF-FM) 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA) 3′-(ص-hydroxyphenyl) fluorescein (HPF) OxyBURST Green (Oxyburst) and Peroxy-Fluor 2 (PF2). (ج) Treatment of a quinolone-resistant strain (gyrA17) with norfloxacin does not produce detectable ROS. Data shown reflect mean ± SEM of three or more technical replicates. Where appropriate, statistical significance is shown and computed against the no-treatment control or no-dye control (*ص ≤ 0.05 **ص ≤ 0.01 ***ص ≤ 0.001).

Recent critiques of this evolving model have misinterpreted an essential aspect of the hypothesis. Specifically, these recent studies (49 ⇓ –51) are predicated on the notion that ROS are the sole arbiters of antibiotic lethality, thereby implying that the model suggests that antibiotics do not kill by disrupting their well-established, target-specific processes. However, the evolving model is completely consistent with the literature indicating that bactericidal antibiotics are capable of inducing lethal cellular damage via interference with target-specific processes, ultimately resulting in cell death. Rather than refute this traditional view of antibiotic action, the hypothesis extends it by suggesting that an additional component of toxicity results from ROS, which are generated as a downstream physiological consequence of antibiotics interacting with their traditional targets. In this respect, reactive species are thought to contribute causatively to drug lethality.

However, an important gap exists in our general understanding of how bacteria respond physiologically to antibiotic–target interactions on a system-wide level, how these responses contribute to antibiotic killing, and how the extracellular environment protects or exacerbates the intracellular contributions to cell death. Here, we use a multidisciplinary set of biochemical, enzymatic, biophysical, and genetic assays to address these issues and expand our understanding of antibiotic-induced physiological responses and factors contributing to antibiotic lethality. Data from the present work indicate that antibiotic lethality is accompanied by ROS generation and that such reactive species causatively contribute to antibiotic lethality.


CONFLICTS OF INTEREST

Christian Tennert: Conceptualization (lead) Formal analysis (equal) Methodology (equal) Project administration (equal) Supervision (equal) Writing-original draft (equal) Writing-review & editing (equal). Ann-Christin Reinmuth: Data curation (equal) Formal analysis (equal) Investigation (equal) Visualization (equal). Katharina Bremer: Data curation (equal) Investigation (equal). Ali Al-Ahmad: Conceptualization (equal) Funding acquisition (equal) Methodology (equal) Writing-review & editing (equal). Lamprini Karygianni: Formal analysis (equal) Visualization (equal) Writing-review & editing (equal). Elmar Hellwig: Resources (lead) Supervision (equal) Writing-review & editing (equal). Kristin Vach: Formal analysis (lead) Methodology (equal) Writing-review & editing (equal). Petra Ratka-Krüger: Project administration (equal) Supervision (equal) Writing-original draft (equal). Annette Wittmer: Data curation (equal) Investigation (lead) Writing-review & editing (equal). Johan Peter Woelber: Conceptualization (equal) Methodology (equal) Project administration (equal) Supervision (equal) Writing-review & editing (equal).


A heavy inoculum of test organism is incubated in a broth containing nitrate. The organisms capable of producing the nitrate reductase enzyme reduce the nitrate, present in the broth, to nitrite which may then be further reduced to nitric oxide, nitrous oxide, or nitrogen.

The nitrate reduction test is based on the detection of النتريت and its ability to form a red compound when it reacts with sulfanilic acid to form a complex (nitrite-sulfanilic acid) which then reacts with a α-naphthylamine to give a red precipitate (prontosil), which is a water-soluble azo dye.

However, only when nitrate is present in the medium, red color will be produced. If there’s no red color in the medium after you’ve added sulfanilic acid and α-naphthylamine means only that nitrite is not present in the medium.

There is two explanations for this observation.

  1. The nitrate may not have been reduced the strain is nitrate-negative.
  2. The nitrate may have been reduced to nitrite which has then been completely reduced to nitric oxide, nitrous oxide, or nitrogen which will not react with the reagents that react with nitrite the strain is nitrate-positive.

Thus, when nitrite is not detected, it is necessary to test if the organism has reduced nitrate beyond nitrite. This can be done indirectly by adding small amount of Zinc powder to the culture. Zinc powder catalyses the reduction of nitrate to nitrite. The development of the red colour on addition of Zinc indicates that nitrate was not reduced by the organism which suggests that the test organism is not capable of reducing nitrate. If no color change occurs after the addition of zinc, this indicates that the organism reduced nitrate to one of the other nitrogen compounds and thus is a nitrate reducer.

ملحوظة: A Durham tube is placed in the nitrogen broth in order to detect deterioration of the broth before inoculation, as evidenced by gas formation in the tube and to identify denitrification by organisms that produce gas by alternate pathways.


شاهد الفيديو: الأكسدة والاختزال (يوليو 2022).


تعليقات:

  1. Judd

    بغض النظر عن مدى صعوبة جربتي ، لم أستطع أن أتخيل مثل هذا الشيء. كيف يمكن ذلك ، لا أفهم

  2. Ashton

    أعتقد ، ما هو - طريقة خاطئة. ومنه فمن الضروري إيقاف.

  3. Talon

    أنا لك سوف أتذكرها! وسوف تؤتي ثمارها معك!

  4. Jager

    ما هي الكلمات المطلوبة ... عبارة رائعة ورائعة



اكتب رسالة